动物性食品中磺胺类药物残留的测定

依据GB 29694-2013 动物性食品中磺胺类药物多残留的测定高效液相色谱法

1. 前处理(以猪肉为例)

预处理:
取匀浆后的猪肉5g,于50ml 离心管中,加50ul,10ppm 的混标,乙酸乙酯20ml,涡旋1min, 4000r/min 离心5min,取上清液于100ml 鸡心瓶中,残渣加乙酸乙酯20ml,重复提取一次, 合并两次提取液。
鸡心瓶中加入4ml 0.1mol/L 的盐酸溶液,旋转浓缩至少于3ml,转移到10ml 离心管中。
分别用2ml 0.1mol/L 的盐酸溶液和3ml 正己烷清鸡心瓶,转移到同一离心管中,涡旋30s, 3000r/min 离心5min,弃正己烷,再次用正己烷3ml 洗鸡心瓶,转移到同一离心管中,涡旋 30s,3000r/min 离心5min,弃正己烷,取下层液备用
净化:
固相萃取小柱:
InertSep MPC 3ml/60mg 货号5010-27121 或WondaSep MPC 3ml/60mg 货号5010-MPC

活化:2ml 甲醇、2ml 0.1mol/L 的盐酸溶液
上样:将上述备用液上柱,流速1ml/min
淋洗:2ml 0.1mol/L 盐酸溶液
洗脱:4ml 5%氨化甲醇洗脱(5%氨化甲醇:5ml 氨水,加甲醇定容至100ml),
浓缩复溶:将洗脱液40 度氮吹干,加0.1% 甲酸:乙腈溶液(87:13)1ml 溶解残留物, 过滤待分析。

2. 色谱分析

色谱柱:Inertsil ODS-3 5um 4.6*250mm(GB 29694-2013 指定)
流动相:A—0.1%甲酸水溶液B—乙腈
梯度表如下:

时间 A(%) B(%)
0 83 17
5 83 17
10 80 20
22.3 60 40
22.4 10 90
30 10 90
31 83 17
48 83 17

流速:1.0ml/min 柱温:25 进样量:100 ul 检测波长:270nm
仪器:Shimadzu LC-20A

3. 基质加标回收率结果

三次平行实验结果(基质加标浓度为0.1mg/kg 猪肉):

名称 空白加标 基质加标
回收率% RSD % 回收率% RSD %
磺胺吡啶 96.65 2.02 87.24 4.81
磺胺甲基嘧啶 96.08 1.85 97.28 5.26
磺胺二甲基嘧啶 93.84 2.51 89.00 7.30
磺胺甲氧哒嗪 92.45 3.68 87.23 4.62
磺胺间甲氧嘧啶 98.27 1.76 88.10 4.37
磺胺氯哒嗪 90.94 2.11 88.21 3.80
磺胺甲噁唑 98.28 1.94 92.48 3.51
苯酰磺胺 88.29 1.37 85.16 4.11
磺胺二甲氧哒嗪 90.17 2.04 89.65 3.65

4. 结论

在此实验条件下,采用岛津技迩的固相萃取小柱InertSep MPC 3ml/60mg 或WondaSep MPC 3ml/60mg 对猪肉中9 种磺胺类药物进行加标回收率实验,回收率完全满足要求。