动物性食品中环丙氨嗪及代谢物三聚氰胺多残留的测定

依据GB 29704-2013 动物性食品中环丙氨嗪及代谢物三聚氰胺多残留的测定超高效液相色谱- 串联质谱法

1. 前处理(以猪肉为例)

预处理:
称取匀浆好的鸡肉(2±0.02)g,于50 ml离心管中,加3%三氯乙酸溶液20 ml,涡旋混合30 s, 超声10 min,静置10 min,10000 r/min离心10 min。取10 ml上层清液,加入10 ml乙腈饱和的正 己烷,充分振荡混匀,重复一次,取水相溶液备用。

净化:
固相萃取小柱:
WondaSep MPC 3ml/60mg 货号5010-MPC
活化、平衡:3ml 甲醇、3ml 水
上样:取预处理的5ml 溶液过柱
淋洗:3ml 2%甲酸水溶液、3 ml 甲醇
抽干
洗脱:3ml 5%氨化甲醇
浓缩复溶:将收集的洗脱液在50℃下吹干,用2ml 95%乙腈水溶液复溶,过滤,待测。

2. 色谱分析

色谱柱:Inertsil HILIC 2.1 mm × 50 mm ,2μm
流动相:A:10 mmol/L 乙酸铵B:乙腈
梯度洗脱

时间/min B %
0.50 95
4.00 90
4.50 60
6.50 60
6.51 95
10.00 Stop

流速:0.3 ml/min
进样体积:5ul
柱温:30℃
分析仪器:LC-30A 系统
质谱条件
分析仪器:LCMS-8040
离子源:ESI,正离子扫描
离子源接口电压: 4.5 kV
雾化气:氮气3.0 L/min
干燥气:氮气15 L/min
碰撞气:氩气
脱溶剂管温度:250℃
加热?槲露龋400℃
扫描模式:多反应监测(MRM)
驻留时间:100 ms

MRM 参数见下表

编号 中文名称 英文名称 CAS No. 前体离子 产物离子 Q1 Pre
Bais(V)
CE
(V)
Q3 Pre
Bais(V)
1 环丙氨嗪 Cyromazine 66215-27-8 167.1 60.0* -30.0 -20.0 -24.0
          85.0 -30.0 -18.0 -16.0
2 三聚氰胺 Melamine 108-78-1 127.1 85.0* -26.0 -20.0 -17.0
          43.0 -26.0 -33.0 -17.0

表1. MRM 参数

3. 回收率实验

三次平行实验结果(基质加标浓度为0.1mg/kg 猪肉):

将所建立的分析方法用于实际样品分析,检测鸡肉样品,未检测到环丙氨嗪,检测到微量三聚 氰胺,浓度低于定量限。鸡肉样品的MRM 色谱图见图1。基质加标浓度为8 μg/kg 的
添加浓度为8 μg/kg 的鸡肉样品按1 前处理,按2 分析测定加标回收率。加标样品MRM 色谱 图如图2 所示,环丙氨嗪和三聚氰胺加标回收率分别为87.8%、87.5%。


4. 结论

将岛津技迩的混合型强阳离子交换小柱WondaSep MPC、亲水作用色谱柱Inertsil HILIC 分 别用于鸡肉中环丙氨嗪及代谢物三聚氰胺残留量的前处理和色谱分析,当基质加标浓度为8 μg /kg 时,环丙氨嗪和三聚氰胺加标回收率分别为87.8%、87.5%,且保留时间适当。该方法可满 足动物性食品中环丙氨嗪及代谢物三聚氰胺残留量的检测。